摘要
1、一名23岁男性从意大利因佩里亚回瑞士后10天，开始出现淋巴细胞性脑膜炎和附睾炎引起的阴囊疼痛，最初用头孢曲松治疗脑膜炎；
2、通过PCR或血清学检测，排除了单纯疱疹、蜱传性脑炎、肠道病*、麻疹、腮腺炎、风疹和梅*螺旋体感染；
3、宏基因组测序技术从脑脊液中检测出了托斯卡纳病*的全编码序列，脑脊液PCR检测和IgM和IgG血清免疫学检测证实了托斯卡纳病*的检出结果，患者的神经症状在5天后自行恢复；
4、托斯卡纳病*为瑞士地区的罕见病*，本病例为有记载的第4例。
背景
■病*感染是引起无菌性脑膜炎最常见的病因。根据季节和地区的不同，引发脑膜炎的病*包括肠道病*、蜱传性脑炎病*、腮腺炎病*、流感病*以及疱疹病*等。明确致病病*，可以避免不必要地使用抗生素或抗疱疹病*药物。
病例描述
■来自瑞士苏黎世的一名无基础疾病的23岁男性学生，年9月因为连续两天出现头痛、恶心和畏光症状，连续一天睾丸疼痛而入院。该患者入院前曾前往意大利因佩里亚旅行，在出现症状10天前从意大利返回瑞士。患者存在脑膜刺激症状，但是没有局灶性神经功能缺损，皮肤没有异常。患者右侧睾丸肿大、变软，右阴囊超声显示存在低回声不均匀实质区域和阴囊积水，符合附睾炎症状。血清学检测显示C-反应蛋白含量略有升高（13.0mg/l），但白细胞正常（8.82克/升）。HIV检测结果为阴性。脑脊液检查发现出现多细胞增生症状，细胞浓度为53个/μl，主要由淋巴细胞（70%）和单核细胞/巨噬细胞（23%）组成，血糖正常，乳酸增加（3.3mmol/升），总蛋白水平略有上升。
■在等待脑脊液的培养和PCR检测结果时，对患者进行经验性的抗生素治疗，通过静脉注射阿昔洛韦和头孢曲松来控制细菌和疱疹病*感染。两天后，脑脊液的PCR检测和IgM检测结果排除了肠道病*、水痘带状疱疹病*、单纯疱疹病*HSV-1和HSV-2感染的可能。血清IgM检验结果排除了EBV感染、麻疹、腮腺炎、风疹、梅*螺旋体和伯氏疏螺旋体感染的可能。包括培养在内的所有检测结果都未提供有效病原学信息；4天后，对脑脊液和血清样本进行了宏基因组测序病*检测。
■宏基因组测序检测从脑脊液标本中检出了条沙蝇热那不勒斯病*序列，所有序列都属于托斯卡纳病*（TOSV）基因型。血清中没有检出病*序列。之后进行的定量PCR检测，确认脑脊液为TOSV阳性，血清为TOSV弱阳性。IgG和IgM分析显示TOSV强阳性。IgG和IgM分析还显示西西里病*弱阳性，可能与交叉反应有关。在疱疹病*检测报阴后，对患者停止了阿昔洛韦药物治疗（仍然继续抗生素治疗超过10天，从静脉注射头孢曲松调整为口服环丙沙星直至出院）。5天后，头痛和睾丸疼痛症状完全消失。
宏基因组测序和序列分析
■DNA提取和RNA逆转录、cDNA提取分别进行。RNA提取流程中，在逆转录之前加入DNA酶降解DNA，然后将得到的序列进行分析，原始病*序列上传到zenodo(doi: